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审计追踪液相色谱的液质联用技术介绍
点击次数:167 发布时间:2019-01-10
  审计追踪液相色谱的液质联用技术介绍
  液质联用,即审计追踪液相色谱 -质谱联用技术,是目前很好的检测技术,以其快速的分离能力、超高的灵敏度著称.本文将介绍液质联用法的原理,优点,分离方法以及应用,对于想要发高分文章,希望自己的数据被认可的客户,可以了解一下。
  液质联用的原理:
  液质联用是以审计追踪液相色谱为分离系统,质谱为检测系统。样品经过审计追踪液相色谱分离后,流动相分流进入质谱仪,在离子源被电离,产生带有一定电荷、质量数不同的离子。质谱仪依据不同离子在电磁场中的运动行为不同来检测各个离子,根据每一个离子的质荷比(质量与电荷数比值)不同,显示在色谱图上,后通过对色谱图的分析,得到样品的检测数据。
  液质联用法对于样品的要求:
  同任何其他分析方法一样,样品前处理在LC-MS分析中是重中之重的。对所用样品,无论是什么类别,都有如下要求:
  样品清洁,尽量不含杂质,由于蛋白质和肽类在ESI上有很强的响应,这两样化合物尤其要注意;
  样品不宜含有高浓度的难挥发酸(磷酸,硫酸等)及其盐,这些会引起液质联用仪很强的噪声;
  为了防止堵塞柱子、喷口及毛细管入口,样品的粘度不要太大。
  液质联用法用于样品分离的常用方法:
  1.固相萃取(SPE)
  这是应用广泛的处理样品的方法,固定相是吸附剂,流动相是萃取过程中的水样。当固定相与流动相接触时,其中的某些痕量物质就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱,即可达到富集和纯化目标物的目的。
  分离方法的比较
  方法优点缺点
  液液萃取法仪器设备简单,应用广泛工作量大,溶剂消耗大,污染环境
  蛋白沉淀操作简单,仪器设备简单检测灵敏度低,非特异性沉淀
  固相萃取回收率高,重现性好。需要建立方法,成本较高
  2.阻定性进入介质:
  阻定性进入介质(restricted access ,RAM)有两层不同的表面,即外层表面与内层表面,外层表面通过体积排除作用仅允许小分子进入内层表面。内层表面通过传统的分配作用“捕获”被分析物。RAM介质常用于在大分子共存时小分子样品的分离和富集.可有效地除去血液和尿液中的基质。
  3.灌注固相萃取:
  灌注填料是近些年才出现的一种填料,颗粒上同时有贯通型的孔以及扩散型的穴。这种填料制成的固相萃取用品或液相柱,可以以每min几十ml的速度上样,用于诸如培养基中蛋白质和肽类的分离、富集和脱盐,具有不可比拟的优势。
  4.超滤:
  超滤(ultrafiltration)是一种加压膜分离技术,小分子溶质和溶剂在一定压力下,穿过一定孔径的特制的薄膜,过滤了大分子物质,从而达到纯化大分子物质的目的。具有操作简便,成本低廉,条件温和等众多优势,但不能用于蛋白溶液。
  5.免疫亲和萃取:
  免疫亲和萃取是基于固相化的配基(抗体)和样品之间的相互作用的样品前处理方法,具有分离效率高、专属性高等优点。其原理是分析物(抗原)结合特异性抗体,可以通过不同于样品溶液PH或离子强度的缓冲液洗脱而达到分离和纯化的目的。 上一篇 浅析EPC气相色谱法在煤化工领域的应用 下一篇 苯系物检测气相色谱的基本原理和优缺点

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